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Rudnei da Rosa nasceu em Florianópolis, Santa Catarina, em 7 de outubro de 1984. Iniciou sua carreira no futebol nas categorias de base do Avaí Futebol Clube.
Após se destacar no Avaí, Rudnei foi contratado pelo Cruzeiro Esporte Clube em 2007. No clube mineiro, conquistou o Campeonato Mineiro em 2008 e 2009. Em 2010, transferiu-se para o Grêmio Foot-Ball Porto Alegrense, onde permaneceu por duas temporadas.
Em 2012, Rudnei retornou ao Cruzeiro, onde conquistou mais um Campeonato Mineiro em 2014. Posteriormente, atuou por clubes como Ponte Preta, Vitória e Chapecoense.
Rudnei foi convocado para a Seleção Brasileira Sub-20 em 2003, disputando o Campeonato Mundial da categoria. No entanto, não chegou a atuar pela Seleção principal.
Rudnei era um meio-campista versátil, conhecido por sua habilidade técnica, visão de jogo e capacidade de finalização. Atuava principalmente como volante, mas também podia jogar como meia-atacante.
Rudnei anunciou sua aposentadoria do futebol profissional em 2020, aos 36 anos. Atualmente, trabalha como comentarista esportivo.